Bazı evcil hayvanlarda albuminin elektroforetik ve boya bağlanma yöntemleri ile karşılaştırmalı tayini ve spesifitelerinin belirlenmesi
No Thumbnail Available
Date
2008
Authors
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Abstract
Günümüzde albumin tayininde genellikle bromocreosol purple (BCP) ve bromocreosol green (BCG) gibi fitalein
boyalar kullanılmaktadır. Ancak bu yöntemlerde albuminin boya bağlanma affinitesi türlere göre farklılıklar göstermekte, preanalitik
ve analitik faktörler de sonuçlar üzerinde etkili olmaktadır. Bu çalışmada domuz, sığır ve koyunda albumin düzeylerinin BCP ve
BCG boya bağlanma yöntemlerinden, kan örneklerinin serum veya plazma olmasından, kullanılan antikoagülanlardan ve albumin
standartlarından ne ölçüde etkilendiğinin gösterilmesi amaçlanmıştır. Ayrıca BCG boya bağlanma yönteminde ölçüm süresinin
albumin düzeylerine etkileri de araştırılmıştır. Hayvanlardan kan örnekleri normal, heparinli ve sitratlı vakumlu kan alma tüpleri
kullanılarak alınmıştır. Serum örneklerinde toplam protein düzeyleri ölçülmüş, protein elektroforezi ile albumin miktarı (g/dL)
hesaplanmıştır. Ayrıca serum ile heparinize ve sitratlı plazmada BCP ve BCG boya bağlanma yöntemleri ile domuz, sığır ve koyun
albumin standartları kullanılarak albumin tayini gerçekleştirilmiştir. BCG boya bağlanma yöntemi ile gerçekleştirilen albumin
analizlerinde ölçümler 36. ve 144. saniyeler olmak üzere iki farklı sürede yapılmıştır. Analiz sonuçlarına göre domuzlardan sağlanan
kan örneklerinin BCP ve BCG boya bağlanma yöntemleri ile albumin tayinlerinde örneğin serum ya da heparinli veya sitratlı plazma
olmasının albumin düzeyleri üzerinde bir etkisi gözlenmemiştir (p≥0.05). Ancak sığır veya koyun albumin standardının kullanılması
albumin sonuçlarında artışa neden olmuştur (p≤0.001). Sığırlarda kan örneğinin heparinli veya sitratlı plazma olması BCP yöntemi
ile yaplan analizlerde albumin seviyesinin yüksek bulunmasına neden olmaktadır (p≤0.05). Bu durum BCG yöntemi ile sadece 144.
saniyede heparinli plazma kullanıldığında gözlenmektedir (p≤0.05). Sığırlarda kan örneklerinin albumin düzeylerinin ölçülmesinde
domuz albumin standardının kullanılması albumin seviyesinde azalmaya, koyun albumin standardının kullanılması artışa neden
olmuştur (p≤0.001). Koyunlarda ise, domuzlarda olduğu üzere kan örneklerinin serum ya da heparinize veya sitratlı plazma olması
BCP yönteminde sonuçları etkilemezken (p≥0.05) BCG yönteminde heparinli plazma örnekleri albumin düzeylerinde artışa neden
olmuştur (p≤0.05). Analizlerde domuz ve sığır albumin standartlarının kullanılması albumin düzeylerinde azalmaya neden
olmaktadır (p≤0.001). BCP yöntemi ile yapılan albumin düzeyi ölçümlerinde mutlaka türe özgün albumin standartlarının ve BCG
yöntemi ile domuzlarda albumin düzeylerinin ölçümünde de domuz albumin standardının kullanılması gerektiği, sığır ve koyunlarda
BCG yöntemi ile albumin tayinlerinde sığır ve koyun albumin standartlarının birbirlerinin yerine kullanılabileceği kanaatine
ulaşılmıştır. BCG yönteminde ölçüm süresinin kullanılan örnekler ve standartlara bağlı olarak sonuçları etkileyebileceğini
göstermektedir.
Bromocreosol purple and Bromocreosol green phytalein dyes are commonly used for determination of albumin.
Dye binding activity varies among the species and also preanalytical and analytical factors have effect on the results. In this study
pig, bovine and sheep samples were assayed with BCP and BCG dye binding methods by comparing the factors such as
anticoagulants used while sampling and species specific albumin standard used in analysis. The effect of reaction time on BCG
method also considered. Blood samples were taken from the animals with heparinized, citrated and normal vacuum sampling tubes.
In sera total protein values were determined and with serum protein electrophoresis albumin values were calculated. In serum,
heparinized and citrated samples together with bovine, sheep and pig species specific standards albumin values were determined by
BCP and BCG dye binding methods. In BCG dye binding method two different reaction times were chosen as 36 and 144 seconds.
According to the results in pig samples the way of samples (heparinized, citrated and serum) taken and the chosen dye binding
method (BCP and BCG) does not have effect on the results (p≥0.05). However the use of sheep and albumin standards causes a rise
in the results. (p≤0.0001). In bovine samples using heparinized and plasma samples causes a rise in BCP dye binding method.
(p≤0.05). Similar finding observed only in BCG method at 144 seconds with heparinized bovine samples. Using pig albumin
standards in bovine samples causes erroneous low values, using sheep standards causes erroneous high values. In sheep samples
using any anticoagulant (citrate and heparin) does not effect the results in BCP method (p≥0.05). In sheep heparinized samples causes erroneously high results in BCG dye binding method (p≤0.005). Using bovine and pig albumin standards causes erroneously
low albumin values (p≤0.001). In BCP dye binding method species specific albumin standard should be used and in BCG method
when assaying pig samples species specific albumin standard should be used but when assaying sheep and bovine samples both
sheep and bovine albumin standards are suitable for determination. In BCG dye binding method reaction time (36 and 144 seconds)
effects the results when considered together with the factors such sample collection type (serum or plasma) and using species specific
albumin standard.
Description
Keywords
Albumin tayini, Antikoagülant, BCG, BCP, Elektroforez