Aşılama stratejilerinde bir gen aktarım vektörü olarak bohv-4 movar suşu ile bac-bohv-4 elde edilmesi
No Thumbnail Available
Files
Date
2018
Authors
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Sağlık Bilimleri Enstitüsü
Abstract
BoHV-4, herpesviridae ailesinin gammaherpesvirinea alt ailesinde ve rhadinovirus cinsinde yer alan bir etkendir. Virus solunum sistemi enfeksiyonunda, vulvovaginitis, endometritis, mastitis, abort, metritis, dermatitis olgularında tespit edilmiştir. Ayrıca sağlıklı görünümlü hayvanların çeşitli materyallerinden de etken izole edilmiştir.Son yıllarda, BoHV-4 farklı patojenlere ait immundominant antijenlerin aktarımında ve kanser terapisinde yeni bir viral vektör olarak sunulmaktadır. BoHV-4'ün biyolojik ve moleküler özellikleri, onu diğer viral vektörlerden daha avantajlı kılmaktadır.Bu çalışmada, BoHV-4'ün Movar suşu kullanılarak bir viral vektör geliştirilmesi planlanmıştır. Rekombinant virus oluşturmak için, virusun ORF2 ve ORF3 gen bölgelerinin arası BAC-EGFP-Neo kasetin klonlanması için tercih edilmiştir.Hücrede gerçekleştirilen homolog rekombinasyondan sonra, rekombinant viruslar yeşil floresan protein ekspresyonuna bağlı olarak bir antibiyotik olan genetisin direncine göre seçilmiştir.Hirt yöntemi kullanılarak elde edilen rekombinant sirküler viruslar DH10B bakterisine transforme edilmiştir. Son basamakta, bakteriden ekstraksiyonu yapılan BoHV-4-BAC-EGFP, MDBK hücresine transfekte edilmiş ve rekombinant virus hazırlanarak stabilitesi DH10B bakterisinde doğrulanmıştır. Elde edilen BoHV-4-BAC viral vektörün, sahip olduğu özelliklere dayanarak, bu bağlamda ileride yapılması planlanan ülkemizde önemli ekonomik kayıpların nedeni ve/veya zoonoz karakterde etkenlere yönelik aşılamalarda ve başta glioma olmak üzere insan ve hayvanlarda birçok kanserin terapisinde kullanımının yararlı olabileceği düşünülmektedir.
Description
Keywords
:Bacterial Artificial Chromosome (BAC), Bovine Herpesvirus 4, Homolog Rekombinasyon, Memeli Hücre, Viral Vektör